無塵室沉降菌測試標準操作規程
無塵室沉降菌測試標準操作規程
無塵室主要之作用在於(yu) 控製產(chan) 品(如矽芯片等)所接觸之大氣的潔淨度日及溫濕度，使產(chan) 品能在一個(ge) 良好之環境空間中生 產(chan) 、製造，此空間我們(men) 稱之為(wei) 潔淨室。
一、菌落：細菌培養(yang) 後，由一個(ge) 或幾個(ge) 細菌繁殖而形成的一細菌集落，簡稱CFU。通常用個(ge) 數表示。
二、測試方法：沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子於(yu) 培養(yang) 基平皿，經48小時以上培養(yang) ，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落數，來評定潔淨環境內(nei) 的活微生物數，並以此來評定無塵室的潔淨度。
三、所用的儀(yi) 器和設備
1、高壓消毒鍋：使用時參照文件ZJ-JC-SOP-066-00進行操作。
2、恒溫培養(yang) 箱：必須定期對培養(yang) 箱的溫度計進行檢定。
3、培養(yang) 皿：一般采用中90mm×15mm硼矽酸玻璃培養(yang) 皿。使用前將培養(yang) 皿置於(yu) 121℃濕熱滅菌20分鍾。
四、培養(yang) 基：普通營養(yang) 瓊脂培養(yang) 基。將培養(yang) 基加熱熔化，冷卻至約45℃在無菌操作條件下將培養(yang) 基注入培養(yang) 皿，每皿約15m1。待瓊脂培養(yang) 基凝固後，將培養(yang) 基平皿放入30～35℃恒溫培養(yang) 箱中培養(yang) 數小時，若培養(yang) 基平皿上確無菌落生長，即可供采樣用，製備好的培養(yang) 基平皿應在2～8℃的環境中存放。
五、測試步驟
1、采樣方法：將已製備好的培養(yang) 皿放置在預先確定的取樣點，打開培養(yang) 皿蓋，使培養(yang) 基表麵暴露0.5小時，再將培養(yang) 皿蓋上蓋後倒置。
2、培養(yang) ，時間不少於(yu) 48小時。每批培養(yang) 基應有對照試驗，檢查培養(yang) 基本身是否汙染，可每批選定3隻培養(yang) 皿作對照培養(yang) 。
3、菌落計數：用肉眼直接計數，然後用5～10倍放大鏡檢查，有否遺漏。若培養(yang) 皿上有2個(ge) 或2個(ge) 以上菌落重疊，可分辨時仍以2個(ge) 或2個(ge) 以上的菌落計數。
六、注意事項
1、測試用具要做滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。
2、采取一切措施防止人為(wei) 對樣本的汙染。
3、對培養(yang) 基、培養(yang) 條件及其他參數作詳細的記錄。
4、由於(yu) 細菌種類繁多，差別甚大，計數時一般用透射光於(yu) 培養(yang) 皿背麵或正麵仔細觀察，不要漏計培養(yang) 皿邊緣生長的菌落，並須注意細菌菌落與(yu) 培養(yang) 基沉澱物的區別，必要時用顯微鏡鑒別。
5、采樣前應仔細檢查每個(ge) 培養(yang) 皿的質量，如發現變質、破損或汙染的應剔除。
七、測試規則
1）測試狀態
1、沉降菌測試前：被測試無塵室（區）的溫濕度須達到規定的要求，靜壓差、必須控製在規定值內(nei) 。被測試無塵室（區）已消毒。
2、測試狀態有靜態和動態兩(liang) 種，並在報告中注明測試狀態。
3、測試人員：測試人員必須穿戴符合環境潔淨度級別的工作服。靜態測試時，室內(nei) 測試人員不得多於(yu) 2個(ge) 人。
2）測試時間
（1）對單向流，如100級淨化房間內(nei) 及層流工作台，測試應在淨化空調係統正常運行不少於(yu) 10分鍾後開始。
（2）對非單向流，如10000級、100000級以上的淨化房間，測試應在淨化空調係統正常運行不少於(yu) 30分鍾開始。
8沉降菌計數
1）采樣點數目：可按表1確定。在滿足*少測點數的同時，還宜滿足*少培養(yang) 皿數，見表2。
表1 *少采樣點數目
|
麵積(m2) |
潔淨度級別 |
|||
|
100 |
10000 |
100000 |
300000 |
|
|
＜10 |
2～3 |
2 |
2 |
2 |
|
≥10～＜20 |
4 |
2 |
2 |
2 |
|
≥20～＜40 |
8 |
2 |
2 |
2 |
|
≥40～＜100 |
16 |
4 |
2 |
2 |
|
≥100～＜200 |
40 |
10 |
3 |
3 |
注：表中的麵積對於(yu) 單向流無塵室是指送風麵積，對於(yu) 非單向流無塵室是指房間麵積。
表2 *少培養(yang) 皿數
|
潔淨度級別 |
所需Φ90mm培養(yang) 皿數（以沉降0.5小時計） |
|
100 |
14 |
|
10000 |
2 |
|
100000 |
2 |
|
300000 |
2 |
2、采樣點的布置：工作區測試點位置離地0.8～1.5m左右（略高於(yu) 工作麵）。可在關(guan) 鍵設備或關(guan) 鍵工作活動範圍處增加測點，采樣點的布置應力求均勻，避免采樣點在某局部區域過於(yu) 集中，某局部區域過於(yu) 稀疏。
3、記錄：測試報告中應記錄房間溫度、相對濕度、壓差、測試狀態及測試數據。
4、結果計算：用計數方法得出各個(ge) 培養(yang) 皿的菌落數。平均菌落數的計算見下式：m1+m2+……+mn平均菌落數m=n式中：m為(wei) 平均菌落數；m1為(wei) 1號培養(yang) 皿菌落數；m2為(wei) 2號培養(yang) 皿菌落數；mn為(wei) n號培養(yang) 皿菌落數；n為(wei) 培養(yang) 皿總數。
5、結果評定：用平均菌落數判斷無塵室的空氣中的微生物。
6）無塵室（區）內(nei) 的平均菌落數必須低於(yu) 所選定的評定標準（見表3）。
表3
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潔淨級別 |
100級 |
10000級 |
100000級 |
300000級 |
|
標準（平均） |
1個(ge) /皿 |
3個(ge) /皿 |
10個(ge) /皿 |
15個(ge) /皿 |
7、若某無塵室（區）的平均菌落數超過評定標準，則必須對此區域先行消毒，然後重新測試兩(liang) 次，測試結果必須合格。
8、萬(wan) 級無塵室生產(chan) 車間按生產(chan) 工藝和產(chan) 品質量要求，分為(wei) 一般生產(chan) 區、控製區和。設人員換鞋區、男女一、二次更衣室、洗手、手消毒、洗衣間、風淋室通道、潔淨人流走廊、物流貨淋走道、注塑間、膠墊吹塵、中儲(chu) 庫、組裝間、內(nei) 包裝間、外包裝間及機房、物流等。機房需做隔音防震處理;設備運行負荷符合樓板承重要求。
人員流動方向：換鞋、更衣、洗手、手消毒–風淋通道–潔淨走廊–潔淨車間在走廊設安全門，便於(yu) 人員疏散。物品流動方向：物流通道——潔淨車間——–成品包裝。